Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
_tR -1о
K о —
tt - t0
tR - время удерживания (или объём) или расстояние, измеренное по базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляра, опущенного из максимума пика, соответствующего компоненту,
t0 - «мёртвое» время (или объём): время (или объём) или расстояние, измеренное по базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляра, опущенного из максимума пика, соответствующего неудерживаемому компоненту,
tt - время удерживания (или объём) или расстояние, измеренное по базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляра, опущенного из максимума пика, соответствующего компоненту, который полностью проникает в поры неподвижной фазы.
Фактор удерживания (подвижности)
Фактор удерживания (подвижности RF ), используемый в плоскостной хроматографии, представляет собой отношение расстояния от точки нанесения пробы до центра пятна и расстояния, пройденного фронтом растворителя от точки нанесения пробы.
Rf _ -
a
b - расстояние, пройденное веществом, a - расстояние, пройденное фронтом растворителя.
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ
Пик может быть охарактеризован площадью пика (A) или высотой пика (h) и шириной пика на половине высоты (wh) или высотой пика (h) и шириной пика между точками перегиба (w). Для гауссовских пиков (Рисунок 2.2.46.-1) справедливо соотношение:
wh _ 1,18 wi
Рисунок 2.2.46.-1.
Фактор асимметрии
Фактор асимметрии пика (As) (Рисунок 2.2.46.-2) рассчитывается из выражения:
A _ w0,05
A S -
s 2d
wo.os - ширина пика на одной двадцатой высоты,
d - расстояние между перпендикуляром, опущенным из максимума пика и передним краем пика на одной двадцатой высоты.
Если фактор ассиметрии равен 1,0 - это означает полную (идеальную) симметрию.
Рисунок 2.2.46.-2.
Эффективность колонки и число теоретических тарелок
Эффективность колонки, в зависимости от метода, может быть рассчитана из данных, полученных как при изотермическом, изократическом режимах, так и при режиме постоянной плотности, как число теоретических тарелок (n) из следующего выражения, в котором величины tR и wh должны быть выражены в одинаковых единицах (время, объём или расстояние).
N _ 5,54
t
R
V wh 0
tR - время удерживания (или объём) или расстояние, измеренное по базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляра, опущенного из максимума пика, соответствующего компоненту,
wh - ширина пика на половине высоты.
Число теоретических тарелок зависит от компонента, колонки и времени удерживания.
ПАРАМЕТРЫ РАЗДЕЛЕНИЯ Разрешение
Разрешение (Rs) близких по высоте пиков двух компонентов может быть рассчитано из выражения:
R _ 1,18(tR2 ~ tRi )
whi + wh2 tR2 > tRi
tR1 и tR2 - времена удерживания или расстояния, измеренное по базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляров, опущенных из максимумов двух соседних пиков,
wh1 и wh2 - ширина пиков на половине высоты.
Разрешение более 1,5 соответствует разделению пиков до базовой линии.
Выражение, приведенное выше, не может быть использовано в случае, когда пики сильно различаются по высоте.
В количественной плоскостной хроматографии вместо времён удерживания используются пройденные расстояния, и разрешение может быть рассчитано с использованием выражения:
R 1,18a(RF2 — RFi )
Rs _----------------
whi + wh2
RF1 и RF2 - отношения расстояний от точки нанесения пробы до центров пятен и расстояния, прошедшего фронтом растворителя от точки нанесения пробы (фактор подвижности),
wh1 и wh2 - ширина пиков на половине высоты, a - расстояние, прошедшее фронтом растворителя.
Коэффициент разделения пиков
Коэффициент разделения неполностью разделённых пиков (р//-параметр) может быть использован в качестве требования пригодности хроматографической системы при выполнении испытания на родственные соединения в случае неполного отделения примеси от анализируемого вещества (аналита) (Рисунок
2.2.46.-3).
/ Hp
p / v _ ——
Hv
Hp - высота пика примеси относительно экстраполированной базовой линии,
Н/ - расстояние между экстраполированной базовой линией и нижней точкой кривой, разделяющей пики примеси и аналита.
Рисунок 2.2.46.-3.
Относительное удерживание
Относительное удерживание (r) рассчитывается из выражения:
tR2 tM
r _—--------
tRi — tM
